不同证候的注意缺陷多动障碍患儿多巴胺D2受体基因携带情况检测
作者：李宜瑞 陈晓刚 李迎敏 徐秋英 黄福群 詹淑英
单位：
关键词：轻微脑损伤综合征；病理生理学；受体，多巴胺；D2；心脾两虚；中医病机；肾虚火动；中医病机；儿童
广州中医药大学学报990105摘要：注意缺陷多动障碍(attention deficit hypercativity disorder, ADHD)是常见的儿童行为障碍，目前病因尚未明确。国外近年由于分子生物学方法的介入，发现多巴胺 D2受体 Taq I A1 等位基因与本病相关。通过对广州市城镇学龄儿童多巴胺 D2 受体基因Taq I A 多态性的检测，支持 A1等位基因与本病的关系 (P=0.006520);并发现该基因与中医辨证的“肾虚肝亢”证候关系更为密切 (P=0.000122)，而“心脾不足”证候则与正常对照组间无显著性差异(P=0.910952)，因而在基因水平上为 ADHD 的中医辨证提供了参考思路。
, http://www.100md.com
中图分类号：R748 文献标识码：A
文章编号：1007-3213(1999)01-0017-04
Determination of Dopamine D2 Receptor Gene in Attention Deficit Hyperactivity
Disorder with Different TCM Syndrome
LI Yi_rui， CHEN Xiao_gang， LI Ying_min， XU Qiu_ying，HUANG Fu_qun， ZHAN Shu_ying
(The First Affiliated Hospital,Guangzhou University of TCM,Guangzhou 510405,China)
, 百拇医药
Abstract：Attention deficit hyperactivity disorder(ADHD)is a common behavior disorder in children and its pathogenesis remains unknown.It has been reported in foreign literature that the A1 allele of the Taq I polymorphism of the dopamine D2 receptor gene(DRD2)was related to ADHD.In this study,the school_age children were examined by the above technique,and the results supported the relationship between the allelic gene and ADHD(P=0.006520),especially those with the syndrome of kidney deficiency and liver hyperactivity(P=0.000122)while not related to those with the syndrome of deficiency of heart and spleen(P=0.910952).This may supply a genetic basis for the syndrome differentiation of ADHD in TCM.
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Key words:ATTENTION DEFICIT DISORDER WITH HYPERACTIVITY/physiopathol.;
RECEPTOR,DOPAMINE D2; HEART_SPLEEN DEFICIENCY/pathogen(tcm);
KIDNEY DEFICIENCY FIRE/pathogen(tcm)； CHILD
注意缺陷多动障碍(attention deficit hyperactivity disorder,ADHD)是常见的儿童行为障碍，以注意缺陷、多动不宁、冲动任性等为主要表现。患病率各家报道差异较大，国外报道为 5%～10%[1]，国内报道为 1.5%～10%[2]，本病男童与女童之比约为2～9∶1[2]。由于本病的患病率较高，对学龄儿童的身心健康及学习生活的影响和危害较大，特别是近来一些长期的跟踪调查结果表明其预后并非如以前所认为的那样良好，反而与吸烟、酗洒、反社会行为甚至违法犯罪有密切关系[3]，现已得到越来越多的重视。许多精神病学家、神经病学家、儿科学家、心理学家及教育学家等，从流行病学、病因、生化、脑电生理、治疗及预后等多方面进行了研究。对于本病的病因研究，一直是令人关注的领域，但由于行为精神疾病的复杂性和研究方法的限制，未能得到满意的结果。近几年来，在国外由于分子生物学方法的介入，开辟了新的研究途径，使 ADHD 发病的机制在基因水平上得到了一定的阐释。但其研究对象一般针对白种人，由于人种不同，基因库(gene pool)亦有所不同，相同基因座位上的频率也应该存在差异，而国内尚无有关 ADHD 基因研究的报道。我们于1998年2～8 月份通过对 76 名广州市城镇学龄儿童多巴胺 D2 受体基因(dopamine D2 receptor gene,DRD2)Taq I A 多态性的检测，研究其 A1等位基因与本病及中医辨证证候分型的相关性，初步探讨 ADHD 在分子遗传学上的发病机理和其中医辨证证候分型在基因水平的依据。
, 百拇医药
1 研究对象
全部为 6～12 岁广州市儿童，智商正常；病例组 46 例来自本院专科门诊，未经中西医治疗，全部符合美国精神疾病《诊断统计手册 第四版》(DSM-IV)的 ADHD 临床诊断标准，排除了精神发育迟滞、广泛性发育障碍、抽动障碍、器质性精神障碍等，按 1997 年版普通高等教育中医药规划教材(6版)《中医儿科学》所定的中医辨证分型标准，选临床最常见之“肾虚肝亢”和“心脾不足”两型；对照组 30 例为健康城市儿童。
2 材料和方法
2.1 试剂
InstaGeneTM全血试剂盒(由美国 BIO-RAD 公司提供)；引物 971 和 5014(由中山医科大学达安基因诊断中心合成)；Taq I 限制性内切酶及缓冲液(由华美生物技术有限公司提供)；PCR 反应液(含有 dNTP MgCl2、反应缓冲液等)(由蓝星生物科技开发有限公司提供)等。
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2.2 仪器
Perkin-Elmer GeneAmp PCR System 9600(热循环仪);BIO-RAD PowerPac 3000 Power Supply, Sequi-Gen Nucleic Acid Sequencing Cell(高压垂直电泳仪); Herrich Zentrifugen Universal 30RF 4990-09(高速冷冻离心机)；电热恒温水槽；紫外透射反射分析仪等。
2.3 方法
模板 DNA 按美国 BIO-RAD 公司提供的全血试剂盒和推荐的方法制备。用引物 5014 和 971 扩增—跨越 DRD2 基因 Taq I A 多态性部位的 310-bp 片段。扩增在 35 μL 反应液中进行(含有35～50 ng模板 DNA，50 pmol 引物，1 mg MgCl2，10 mmol Tris_HCl,200 μmol dNTP, 1.5 单位 Taq DNA 聚合酶及反应缓冲液等)。反应液在热循环仪中先于 94℃ 预变性 5 min，再于 94℃ 变性 40 s,50℃ 退火 40 s，72℃ 延伸 50 s，经 35 个循环后于 72℃ 延伸 5 min。移取 10 μL 扩增产物并用 5 单位 Taq I 限制性内切酶在 65℃ 水解 4 h，然后在含有溴乙锭的 2.5% 琼脂糖凝胶上电泳，最后在紫外光下读取结果。 A1/A2 基因型可观察到 3 个片段(310-bp,180-bp,130-bp)。A2/A2 基因型可观察到 2 个片段(180-bp,130-bp),A1/A1 基因型可观察到未剪切的 310-bp 片段。
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2.4 统计方法
分别统计 ADHD 患者病例组(由肾虚肝亢组和心脾不足组组成)及其两个证候组和对照组 A1 等位基因的基因频率 (fA1)及携带率(pA1)，并用χ2检验法检验各组间差异，以研究 A1 等位基因与 ADHD 及两个证候间的相关性。
3 结果
A1 等位基因与 ADHD 及其证候的相关性(见表1)。
表1 A1等位基因与 ADHD 及其证候的相关性
N总/例
NA1/A1/例
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NA1/A2/例
NA2/A2/例
pA1/%
χ2
P
fA1
病例组
46
7
25
, 百拇医药
14
69.6
6.716
0.00955272
0.424
肾虚肝亢组
30
7
19
4
86.7
13.819
0.00020146
, http://www.100md.com
0.550
心脾不足组
16
0
6
10
37.5
0.07
0.79108381
0.188
对照组
30
4
, http://www.100md.com
7
19
36.7
0.250
A1/A1 为携带 2 个A1 基因；A1/A2 为携带 1 个 A1 基因和1 个 A2 基因；余类推
4 讨论
越来越多的研究资料显示 ADHD 具有高遗传倾向。1991 年，美国学者 Comings 等首先报道了 DRD2 Taq I A1 等位基因与 ADHD 的关系[4] 。美国是一个多种族、多民族融合的社会，不同种族和民族间相同基因座位上的频率并不相同，虽然 Comings 等的研究将对照组限定为非西班牙裔的白种人，但仍因难以完全解决该问题而受到一些学者的质疑[5]。我们研究的对象限定于广州市城镇汉族儿童，所以应不?存?在?上?述?问?题。结?果?显示，病例组 A1等位基因的携带率为 69.6%，而对照组为 36.7%，两组间差异有显著性(χ2=7.461，P=0.00955272)，得到的结果支持 Comings 等对于 A1 等位基因与 ADHD 相关的结论。我们研究的对照组 A1 等位基因携带率(36.7%)高于美国学者所研究的美国正常人群，而一些对移居到美国的华裔及我国台湾省居民正常人群的抽样结果也显示其 A1 等位基因携带率普遍较高[6]。Noble等[7]通过对冰冻脑标本的研究，发现携带 A1 等位基因的标本中 DRD2 的浓度比只携带 A2 等位基因的标本约少 30%，这在 Thompson[8]等利用正电子发射断层摄影术(positron emission tomography,PET)对活体的研究中得到进一步的支持。A1等位基因导致 DRD2 浓度的降低的原因迄今为止尚不清楚，推测可能是与基因的调控有关。突触后 DRD2 浓度的降低可导致多巴胺系统缺陷，使人不能持续性地保持注意，并出现多动、冲动等临床症候。研究表明临床常用的治疗药物利他林、苯丙胺等多巴胺激动剂正是由于可以提高多巴胺系统功能，如抑制多巴胺转运子的作用，使突触间隙维持较高的多巴胺浓度，并可能通过反馈系统的调节增加突触后 DRD2 的浓度而改善 ADHD 症状的[3]。
, 百拇医药
临床实践表明，中医药治疗 ADHD 虽然起效较慢，疗程较长，但疗效较稳定，停药反跳较少，基本无副作用，且增进食欲，改善睡眠，增强体质，起全面调节作用[9]。目前对中医治疗 ADHD 的机理探索还比较少，特别是其诊治核心“证”的实质是什么，缺乏相关研究。我们的研究发现，ADHD 患者按中医辨证为“肾虚肝亢”“心脾不足”的这两种证候中，“肾虚肝亢”证候与 A1 等位基因的关系极为密切(χ2=14.467，P=0.000122)，而“心脾不足”证候则与正常对照组之间无显著性差异(χ2=0.013，P=0.910952)，这可能提示 ADHD 的两种证候的发病机理在基因水平上并不相同。鉴于遗传基因应是相对稳定的，而证候却是能转变的，所以不能机械地将基因同证型简单对应。我们认为，问题的关键是基因表达的方式和程度。如前所述，携带 A1 等位基因的个体脑内多巴胺 D2 受体的浓度比只携带 A2 等位基因者约少 30%，据此，“肾虚肝亢”证与 A1 等位基因的相关性是否说明了其与 DRD2 的低表达程度有关呢?国外最新研究提示携带 A1 等位基因的患者对兴奋剂的作用较敏感，疗效也较好，有学者认为这是由于通过反馈系统的调节作用产生了更多的 DRD2 所致[3]。那么，中医药对“肾虚肝亢”证的 ADHD 患者辨证论治的临床疗效是否说明了滋补肾阴和(或)潜降肝阳药物对 DRD2 基因的表达具有调控作用?是怎样起作用?与兴奋剂的作用有什么相同和(或)不同之处?这些需要分子药理学的进一步研究。
, 百拇医药
此外，国外近来的研究显示，ADHD 的遗传模式很可能是多基因遗传。这说明其他基因也可能与 ADHD 相关[5，10，11]。所以，本研究中“心脾不足”证候与对照组间无显著性差异虽然可能提示 DRD2 Taq ⅠA1 等位基因与此证候患者的发病关系不大，但并不能排除其他基因的影响，所以对基因与 ADHD 的中医证候分型关系的认识，有赖于对上述甚至更多未知基因的深入研究。
据目前的文献检索和搜集来看，国内尚无对 ADHD 的分子遗传学方面的研究报道，国外也是 90 年代后才开始起步，资料来源匮乏，所以，我们的研究不可避免地存在一些不足之处：①由于时间和经费上的限制，病例数较少，使结果的判定受到了一些影响，需要搜集更多的病例，以期进一步探求 DRD2 Taq ⅠA1 等位基因在 ADHD 的遗传性中的作用；②未能对可能与 ADHD 有关的其他基因进行研究，因而对基因在 ADHD 及其中医辨证的认识尚待全面和深入；③我们只选取最常见之“肾虚肝亢”和“心脾不足”两种证候，而在临床实践中，ADHD 并不是单纯地只存在这两种证候，如何更有效地将中医辨证与实验研究结合起来，提高临床诊治水平，需作深入探讨。
, 百拇医药
基金项目：广东省中医药管理局资助课题，编号 B97-58
作者简介：李宜瑞，女，副教授；
参考文献：
[1] Szatmari P. The epidemiology of attention_deficit hyperactivity disorder [J]. Child Adolesc Psychiatry Clin North Am，1992，1:361
[2] 李雪荣主编.现代儿童精神病学.湖南：湖南科学技术出版社，1994.229
[3] Blum K,Cull J G,Braveman E R,et al.Reward deficiency syndrome [J].Am Scientist,1996,Mar_Apr
, 百拇医药
[4] Comings D E,Comings B G,Muhleman D,et al.The dopamine D2 receptor locus as a modifying gene in neuropsychiatric disorder [J].JAMA,1991,266(13):1793
[5] Cook E H,Stein M A,Krasowski M D,et al.Association of attention_deficit disorder and the dopamine transporter gene[J].Am J Hum Genet,1995,56:993
[6] Castiglione C M,Deinard A S,Speed W C, et al.Evolution of haplotypes at the DRD2 locus [J].Am J Hum Genet,1995,57:1445
, 百拇医药
[7] Noble E P,Blum K,Ritchie T,et al.Allelic association of the D2 dopamine receptor gene with receptor_binding characteristics in alcoholism [J].Arch Gen Psychiatry,1991,48(7):648
[8] Thompson J,Thomas N,Singleton A,et al.D2 dopamine receptor gene(DRD2)Taq Ⅰ A polymorphism:reduced dopamine D2 receptor binding in the human striatum associated with the A1 allele [J].Pharmacogeneties,1997,7(6):479
, http://www.100md.com
[9] 冷方南，王远任，凌耀星，等.儿童多动症临床治疗学[M].北京：中国医药科技出版社，1994.132～133
[10] LaHoste G J,Swanson J M,Wigal S B,et al.Dopamine D4 receptor gene polymorphism is associated with attention deficit hyperactivity disorder[J].Mol Psychiatry,1:121
[11] Comings D E, Wu S, Chiu Connie,et al.Polygenic inheritance of Tourette Syndrome,stuttering,attention deficit hyperactivity disorder,conduct,and oppositional defiant disorder;the additive and subtractive effect of the three dopaminergic genes_DRD2, D β H，and DAT1 [J].Am J Med Genet(Neuropsychol Genet),1996,67:264
收稿日期：1998-09-09, http://www.100md.com
单位：
关键词：轻微脑损伤综合征；病理生理学；受体，多巴胺；D2；心脾两虚；中医病机；肾虚火动；中医病机；儿童
广州中医药大学学报990105摘要：注意缺陷多动障碍(attention deficit hypercativity disorder, ADHD)是常见的儿童行为障碍，目前病因尚未明确。国外近年由于分子生物学方法的介入，发现多巴胺 D2受体 Taq I A1 等位基因与本病相关。通过对广州市城镇学龄儿童多巴胺 D2 受体基因Taq I A 多态性的检测，支持 A1等位基因与本病的关系 (P=0.006520);并发现该基因与中医辨证的“肾虚肝亢”证候关系更为密切 (P=0.000122)，而“心脾不足”证候则与正常对照组间无显著性差异(P=0.910952)，因而在基因水平上为 ADHD 的中医辨证提供了参考思路。
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中图分类号：R748 文献标识码：A
文章编号：1007-3213(1999)01-0017-04
Determination of Dopamine D2 Receptor Gene in Attention Deficit Hyperactivity
Disorder with Different TCM Syndrome
LI Yi_rui， CHEN Xiao_gang， LI Ying_min， XU Qiu_ying，HUANG Fu_qun， ZHAN Shu_ying
(The First Affiliated Hospital,Guangzhou University of TCM,Guangzhou 510405,China)
, 百拇医药
Abstract：Attention deficit hyperactivity disorder(ADHD)is a common behavior disorder in children and its pathogenesis remains unknown.It has been reported in foreign literature that the A1 allele of the Taq I polymorphism of the dopamine D2 receptor gene(DRD2)was related to ADHD.In this study,the school_age children were examined by the above technique,and the results supported the relationship between the allelic gene and ADHD(P=0.006520),especially those with the syndrome of kidney deficiency and liver hyperactivity(P=0.000122)while not related to those with the syndrome of deficiency of heart and spleen(P=0.910952).This may supply a genetic basis for the syndrome differentiation of ADHD in TCM.
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Key words:ATTENTION DEFICIT DISORDER WITH HYPERACTIVITY/physiopathol.;
RECEPTOR,DOPAMINE D2; HEART_SPLEEN DEFICIENCY/pathogen(tcm);
KIDNEY DEFICIENCY FIRE/pathogen(tcm)； CHILD
注意缺陷多动障碍(attention deficit hyperactivity disorder,ADHD)是常见的儿童行为障碍，以注意缺陷、多动不宁、冲动任性等为主要表现。患病率各家报道差异较大，国外报道为 5%～10%[1]，国内报道为 1.5%～10%[2]，本病男童与女童之比约为2～9∶1[2]。由于本病的患病率较高，对学龄儿童的身心健康及学习生活的影响和危害较大，特别是近来一些长期的跟踪调查结果表明其预后并非如以前所认为的那样良好，反而与吸烟、酗洒、反社会行为甚至违法犯罪有密切关系[3]，现已得到越来越多的重视。许多精神病学家、神经病学家、儿科学家、心理学家及教育学家等，从流行病学、病因、生化、脑电生理、治疗及预后等多方面进行了研究。对于本病的病因研究，一直是令人关注的领域，但由于行为精神疾病的复杂性和研究方法的限制，未能得到满意的结果。近几年来，在国外由于分子生物学方法的介入，开辟了新的研究途径，使 ADHD 发病的机制在基因水平上得到了一定的阐释。但其研究对象一般针对白种人，由于人种不同，基因库(gene pool)亦有所不同，相同基因座位上的频率也应该存在差异，而国内尚无有关 ADHD 基因研究的报道。我们于1998年2～8 月份通过对 76 名广州市城镇学龄儿童多巴胺 D2 受体基因(dopamine D2 receptor gene,DRD2)Taq I A 多态性的检测，研究其 A1等位基因与本病及中医辨证证候分型的相关性，初步探讨 ADHD 在分子遗传学上的发病机理和其中医辨证证候分型在基因水平的依据。
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1 研究对象
全部为 6～12 岁广州市儿童，智商正常；病例组 46 例来自本院专科门诊，未经中西医治疗，全部符合美国精神疾病《诊断统计手册 第四版》(DSM-IV)的 ADHD 临床诊断标准，排除了精神发育迟滞、广泛性发育障碍、抽动障碍、器质性精神障碍等，按 1997 年版普通高等教育中医药规划教材(6版)《中医儿科学》所定的中医辨证分型标准，选临床最常见之“肾虚肝亢”和“心脾不足”两型；对照组 30 例为健康城市儿童。
2 材料和方法
2.1 试剂
InstaGeneTM全血试剂盒(由美国 BIO-RAD 公司提供)；引物 971 和 5014(由中山医科大学达安基因诊断中心合成)；Taq I 限制性内切酶及缓冲液(由华美生物技术有限公司提供)；PCR 反应液(含有 dNTP MgCl2、反应缓冲液等)(由蓝星生物科技开发有限公司提供)等。
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2.2 仪器
Perkin-Elmer GeneAmp PCR System 9600(热循环仪);BIO-RAD PowerPac 3000 Power Supply, Sequi-Gen Nucleic Acid Sequencing Cell(高压垂直电泳仪); Herrich Zentrifugen Universal 30RF 4990-09(高速冷冻离心机)；电热恒温水槽；紫外透射反射分析仪等。
2.3 方法
模板 DNA 按美国 BIO-RAD 公司提供的全血试剂盒和推荐的方法制备。用引物 5014 和 971 扩增—跨越 DRD2 基因 Taq I A 多态性部位的 310-bp 片段。扩增在 35 μL 反应液中进行(含有35～50 ng模板 DNA，50 pmol 引物，1 mg MgCl2，10 mmol Tris_HCl,200 μmol dNTP, 1.5 单位 Taq DNA 聚合酶及反应缓冲液等)。反应液在热循环仪中先于 94℃ 预变性 5 min，再于 94℃ 变性 40 s,50℃ 退火 40 s，72℃ 延伸 50 s，经 35 个循环后于 72℃ 延伸 5 min。移取 10 μL 扩增产物并用 5 单位 Taq I 限制性内切酶在 65℃ 水解 4 h，然后在含有溴乙锭的 2.5% 琼脂糖凝胶上电泳，最后在紫外光下读取结果。 A1/A2 基因型可观察到 3 个片段(310-bp,180-bp,130-bp)。A2/A2 基因型可观察到 2 个片段(180-bp,130-bp),A1/A1 基因型可观察到未剪切的 310-bp 片段。
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2.4 统计方法
分别统计 ADHD 患者病例组(由肾虚肝亢组和心脾不足组组成)及其两个证候组和对照组 A1 等位基因的基因频率 (fA1)及携带率(pA1)，并用χ2检验法检验各组间差异，以研究 A1 等位基因与 ADHD 及两个证候间的相关性。
3 结果
A1 等位基因与 ADHD 及其证候的相关性(见表1)。
表1 A1等位基因与 ADHD 及其证候的相关性
N总/例
NA1/A1/例
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NA1/A2/例
NA2/A2/例
pA1/%
χ2
P
fA1
病例组
46
7
25
, 百拇医药
14
69.6
6.716
0.00955272
0.424
肾虚肝亢组
30
7
19
4
86.7
13.819
0.00020146
, http://www.100md.com
0.550
心脾不足组
16
0
6
10
37.5
0.07
0.79108381
0.188
对照组
30
4
, http://www.100md.com
7
19
36.7
0.250
A1/A1 为携带 2 个A1 基因；A1/A2 为携带 1 个 A1 基因和1 个 A2 基因；余类推
4 讨论
越来越多的研究资料显示 ADHD 具有高遗传倾向。1991 年，美国学者 Comings 等首先报道了 DRD2 Taq I A1 等位基因与 ADHD 的关系[4] 。美国是一个多种族、多民族融合的社会，不同种族和民族间相同基因座位上的频率并不相同，虽然 Comings 等的研究将对照组限定为非西班牙裔的白种人，但仍因难以完全解决该问题而受到一些学者的质疑[5]。我们研究的对象限定于广州市城镇汉族儿童，所以应不?存?在?上?述?问?题。结?果?显示，病例组 A1等位基因的携带率为 69.6%，而对照组为 36.7%，两组间差异有显著性(χ2=7.461，P=0.00955272)，得到的结果支持 Comings 等对于 A1 等位基因与 ADHD 相关的结论。我们研究的对照组 A1 等位基因携带率(36.7%)高于美国学者所研究的美国正常人群，而一些对移居到美国的华裔及我国台湾省居民正常人群的抽样结果也显示其 A1 等位基因携带率普遍较高[6]。Noble等[7]通过对冰冻脑标本的研究，发现携带 A1 等位基因的标本中 DRD2 的浓度比只携带 A2 等位基因的标本约少 30%，这在 Thompson[8]等利用正电子发射断层摄影术(positron emission tomography,PET)对活体的研究中得到进一步的支持。A1等位基因导致 DRD2 浓度的降低的原因迄今为止尚不清楚，推测可能是与基因的调控有关。突触后 DRD2 浓度的降低可导致多巴胺系统缺陷，使人不能持续性地保持注意，并出现多动、冲动等临床症候。研究表明临床常用的治疗药物利他林、苯丙胺等多巴胺激动剂正是由于可以提高多巴胺系统功能，如抑制多巴胺转运子的作用，使突触间隙维持较高的多巴胺浓度，并可能通过反馈系统的调节增加突触后 DRD2 的浓度而改善 ADHD 症状的[3]。
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临床实践表明，中医药治疗 ADHD 虽然起效较慢，疗程较长，但疗效较稳定，停药反跳较少，基本无副作用，且增进食欲，改善睡眠，增强体质，起全面调节作用[9]。目前对中医治疗 ADHD 的机理探索还比较少，特别是其诊治核心“证”的实质是什么，缺乏相关研究。我们的研究发现，ADHD 患者按中医辨证为“肾虚肝亢”“心脾不足”的这两种证候中，“肾虚肝亢”证候与 A1 等位基因的关系极为密切(χ2=14.467，P=0.000122)，而“心脾不足”证候则与正常对照组之间无显著性差异(χ2=0.013，P=0.910952)，这可能提示 ADHD 的两种证候的发病机理在基因水平上并不相同。鉴于遗传基因应是相对稳定的，而证候却是能转变的，所以不能机械地将基因同证型简单对应。我们认为，问题的关键是基因表达的方式和程度。如前所述，携带 A1 等位基因的个体脑内多巴胺 D2 受体的浓度比只携带 A2 等位基因者约少 30%，据此，“肾虚肝亢”证与 A1 等位基因的相关性是否说明了其与 DRD2 的低表达程度有关呢?国外最新研究提示携带 A1 等位基因的患者对兴奋剂的作用较敏感，疗效也较好，有学者认为这是由于通过反馈系统的调节作用产生了更多的 DRD2 所致[3]。那么，中医药对“肾虚肝亢”证的 ADHD 患者辨证论治的临床疗效是否说明了滋补肾阴和(或)潜降肝阳药物对 DRD2 基因的表达具有调控作用?是怎样起作用?与兴奋剂的作用有什么相同和(或)不同之处?这些需要分子药理学的进一步研究。
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此外，国外近来的研究显示，ADHD 的遗传模式很可能是多基因遗传。这说明其他基因也可能与 ADHD 相关[5，10，11]。所以，本研究中“心脾不足”证候与对照组间无显著性差异虽然可能提示 DRD2 Taq ⅠA1 等位基因与此证候患者的发病关系不大，但并不能排除其他基因的影响，所以对基因与 ADHD 的中医证候分型关系的认识，有赖于对上述甚至更多未知基因的深入研究。
据目前的文献检索和搜集来看，国内尚无对 ADHD 的分子遗传学方面的研究报道，国外也是 90 年代后才开始起步，资料来源匮乏，所以，我们的研究不可避免地存在一些不足之处：①由于时间和经费上的限制，病例数较少，使结果的判定受到了一些影响，需要搜集更多的病例，以期进一步探求 DRD2 Taq ⅠA1 等位基因在 ADHD 的遗传性中的作用；②未能对可能与 ADHD 有关的其他基因进行研究，因而对基因在 ADHD 及其中医辨证的认识尚待全面和深入；③我们只选取最常见之“肾虚肝亢”和“心脾不足”两种证候，而在临床实践中，ADHD 并不是单纯地只存在这两种证候，如何更有效地将中医辨证与实验研究结合起来，提高临床诊治水平，需作深入探讨。
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基金项目：广东省中医药管理局资助课题，编号 B97-58
作者简介：李宜瑞，女，副教授；
参考文献：
[1] Szatmari P. The epidemiology of attention_deficit hyperactivity disorder [J]. Child Adolesc Psychiatry Clin North Am，1992，1:361
[2] 李雪荣主编.现代儿童精神病学.湖南：湖南科学技术出版社，1994.229
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收稿日期：1998-09-09, http://www.100md.com